主營日本淑女俱乐部:
動物實驗動物實驗外包科研實驗外包上海動物實驗水迷宮實驗外包動物實驗外包公司動物造模動物模型構建動物行爲學實驗細胞實驗細胞實驗外包細胞培養實驗細胞周期實驗細胞增殖檢測細胞凋亡檢測
日本淑女俱乐部與服務

上海達爲科生物科技有限公司

日本淑女俱乐部:021-55130726

日本淑女俱乐部:021-55130728

日本淑女俱乐部:張豔

日本淑女俱乐部:18017844061

日本淑女俱乐部:jierdun@jrdbio.com

日本淑女俱乐部:上海市长江南路180号长江软件园B区B638室  



日本淑女俱乐部信息

簡單介紹

 的詳細介紹
Co-IP
如果您對該日本淑女俱乐部感興趣的話,可以 給我留言
品牌名稱:其它品牌
日本淑女俱乐部型號:
日本淑女俱乐部展商:
日本淑女俱乐部文檔: 無相關文檔
Co-IP 其它品牌

是以抗體和抗原之間的專一性作用爲基礎的用于研究兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合;也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔,已成爲研究蛋白質相互作用的經典方法。

Co-IP
日本淑女俱乐部産商:
會員價格:0.00
服務:售前咨詢日本淑女俱乐部:400-880-5151
日本淑女俱乐部文檔: 無相關文檔
如果您對該日本淑女俱乐部感興趣的話,可以
Co-IP

Co-IP



一、服務介紹

**共沈澱Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是以抗體和抗原之間的專一性作用爲基礎的用于研究兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合;也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔,已成爲研究蛋白質相互作用的經典方法。

二、**共沈澱實驗原理

當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的很多蛋白質-蛋白質見的相互作用被保留下來。如果以細胞中某蛋白質爲抗原,加入相應抗體,那麽該抗體就能與抗原,以及與該抗原具有相互作用的蛋白質之間形成**複合物,一起沈澱下來。經過SDS-PAGE電泳,western blot和(或)質譜可鑒定出與抗原相互作用的蛋白質。

三、**共沈澱實驗流程

1. 用预冷的PBS洗滌細胞兩次,後一次吸幹PBS

2. 按比例加入适量预冷的RIPA 緩沖液;

3. 用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶上刮下,把悬液转到1.5EP管中,4°C,緩慢晃動(EP管插冰上,置水平搖床上);

4. 4°C离心后,立即将上清转移到一个新的离心管中;

5. 准备Protein A agarose,用PBS 洗兩遍珠子,然後用PBS配制成50%濃度,建議減掉槍尖部分,避免在涉及瓊脂糖珠的操作中破壞瓊脂糖珠;

6. 按比例加入Protein A瓊脂糖珠(50%),4℃搖晃10minEP管插冰上,置水平搖床上),以去除非特異性雜蛋白,降低背景;

7. 4°C离心后,将上清转移到一个新的离心管中,去除Protein A珠子;

8.用BCA法測定蛋白濃度,測前將總蛋白至少稀釋110倍以上,以減少細胞裂解液中去垢劑的影響(定量,分裝後,可以在-20℃保存一個月);

9. 用PBS將總蛋白稀釋到合適濃度;

10. 加入体积的预先稀释的一抗;

11. 4°C緩慢搖動抗原抗體混合物過夜或室溫2h,激酶或磷酸酯酶活性分析建議用2 h室溫孵育;

12. 加入Protein A瓊脂糖珠來捕捉抗原抗體複合物,4°C緩慢搖動抗原抗體混合物過夜或室溫1h

13.瞬時離心5s,收集瓊脂糖珠-抗原抗體複合物,去上清,用預冷的洗液(或PBS)洗3遍;

14. 将上样样品煮5min,以游离抗原,抗体,珠子,离心,将上清電泳,收集剩余琼脂糖珠,上清也可以暂时冻-20℃,留待以后電泳,电泳前应再次煮5min變性。

客戶提供:

1、新鮮的樣本材料(組織、細胞或蛋白溶液)

2、**沈澱的抗體(或由公司代購)及待測蛋白的相關信息

3、用于western blot的一抗

交付內容: 

實驗報告:詳細實驗步驟、圖片等。

服務列表

項目

備注

周期

Co-IP

含一個陽性蛋白和一個陰性蛋白檢測

20個工作日

Western blot

包括蛋白提取,每張膜按8個樣計算(其他三個爲marker,陽性對照,陰性對照)

5個工作日


 




日本淑女俱乐部留言
標題
日本淑女俱乐部
聯系日本淑女俱乐部
內容
驗證碼
點擊換一張
注:1.可以使用快捷鍵Alt+S或Ctrl+Enter發送信息!
2.如有必要,請您留下您的詳細聯系方式!
Copyright@ 2003-2019  上海達爲科生物科技有限公司日本淑女俱乐部      日本淑女俱乐部:0756-2183150 日本淑女俱乐部: 日本淑女俱乐部: 日本淑女俱乐部:
         滬ICP備15041491號-1     

沪公网安备 31011302004470号